分光光度計(jì)的使用方法步驟如下:

　　1)預(yù)熱儀器。為使測(cè)定穩(wěn)定，將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開(kāi)，使光路切斷。

　　2)選定波長(zhǎng)。根據(jù)要求，轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。

　　3)固定靈敏度檔。根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動(dòng)靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。

　　4)調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)。輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開(kāi)的，光路被切斷，光電管不受光照)。

　　5)調(diào)節(jié)T=100%。將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的第一格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。

　　6)測(cè)定。輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華。讀數(shù)后，打開(kāi)比色皿暗箱蓋。

　　7)關(guān)機(jī)。實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

　　分光光度計(jì)操作使用過(guò)程中的注意事項(xiàng)：

　　1)為了防止光電管疲勞。不測(cè)定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開(kāi)，使光路切斷，以延長(zhǎng)光電管使用壽命。

　　2)比色皿的使用方法：

　?、倌帽壬髸r(shí)，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。

　?、谇逑幢壬髸r(shí)，一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機(jī)物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1∶2)浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。

　　每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)立即洗凈比色皿。

　　③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干，以保護(hù)透光面。

　?、軠y(cè)定有色溶液吸光度時(shí)，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測(cè)定一系列溶液的吸光度時(shí)，通常都按由稀到濃的順序測(cè)定，以減小測(cè)量誤差。

　?、菰趯?shí)際分析工作中，通常根據(jù)溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。